Las pruebas diagnósticas son:
·
Tipos de pruebas para detección de
anticuerpos contra el VIH
El ensayo
inmunoenzimatico ( ELISA)
Es la primera prueba aprobada para
diagnosticar la infección por este virus, compuesto de tres tipos de pruebas
: los ensayos de unión directa que usaban como base antigénica un lisado
vírico, y se detectaban los anticuerpos a los 40 días de la infección.
Los de captura de antigeno que es una técnica
de segunda generación que incorporaban
como antígenos proteínas recombinantes y péptidos sintéticos y nuevos
antígenos que permitieron detectar anticuerpos frente a todos los subtipos M
y los grupos N y O y frente a VIH-2,
aumentando la sensibilidad, de los anticuerpos a los 33-35 días tras la
infección. Posteriormente las técnicas de ELISA adquirieron el formato “en
sándwich”, se denominaron ELISA de tercera generación, detectan anticuerpos
de clase IgG e IgM, en un periodo de infección de 22 días.
Estas técnicas se han
modificado utilizando sustratos fluorescentes (ELFA) o formatos de
quimioluminiscencia, lo que permite la automatización, el procesamiento de un
gran número de muestras. Recientemente se han introducido las técnicas de
cuarta generación que permiten la detección simultánea de anticuerpos y
antígeno p24, reduciéndose el período ventana a 13-15 días, es decir, se
aproxima casi a la detección de ARN-VIH. Con estas técnicas la sensibilidad se
incrementa hasta un 99,9% lo que reduce la posibilidad de un resultado
falsamente negativo, esto indica que en principio un resultado negativo no
requiere confirmación ni seguimiento serológico, excepto en personas con alto
riesgo de adquirir la infección.
·
PRUEBAS
Son
pruebas utilizadas para detección de anticuerpos, se basan en la
aglutinación de partículas sensibilizadas de látex, o eritrocitos, técnicas
de Dot-inmunoensayo y de inmunocromatografia capilar, la muestra es
usualmente en sangre total y puede tener una sensibilidad que oscila entre el
85-99% y la especificidad entre el
93-99%. Se suelen producir falsos negativos en muestras con bajo nivel de
anticuerpos o estadios recientes de infección, y falsos positivos en
regiones con alta prevalencia de anticuerpos.
1.
Prueba de aglutinación
de partículas: Se basa en la unión de los anticuerpos de VIH, presentes en
el suero del paciente, con partículas que contienen antígeno del virus en la
superficie. Son técnicas que tienen alta sensibilidad y buena especificidad
en la tamización del virus.
2.
Detección de
anticuerpos en la cavidad Oral: La muestra consiste en un hisopado de las encías y la mucosa
yugal conteniendo niveles detectables de anticuerpos contra VIH-1, siendo de
alta sensibilidad y baja especificidad, requeriendo otra prueba
confirmatoria.
|
3. Pruebas
serológicas para la detección de antígeno: Esta prueba serológica
detecta la presencia de antigeno p24 del VIH-1 en ausencia de anticuerpos
contra el mismo, incorporando el ajuste de PH para separar los complejos
p24-anti a p24 y así
mejorar la sensibilidad de la prueba, esta prueba se detecta positiva en un
tiempo estimado de 26.4 días.
|
·
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
Son pruebas
orientadas a la confirmación de la presencia de la infección por el VIH en
pacientes con pruebas presuntivas positivas y reactivas
|
Western Blot (WB): Es una técnica analítica usada para
detectar proteínas especificas en una muestra determinada, mediante una
electroforesis en gel, donde se separan las proteínas a partir de su peso
molecular, estructura, hidrofobicidad, luego son transferidas a una membrana
absorbente ( típicamente de nitrocelulosa o de PVDF) para poder buscar las proteínas
con anticuerpos específicos contra el virus; finalmente se detecta la unión antígeno-
anticuerpo por actividad enzimática, fluorescencia entre otros métodos. De esta
misma forma se puede estudiar la presencia de la proteína en el extracto y analizar su cantidad reactiva.
La lectura e
interpretación de los resultados por WB debe hacerse siguiendo unas pautas
concretas que pueden ser de la siguiente manera:
1.
un suero es considerado positivo cuando presenta reactividad al
menos frente a 2 de las tres glicoproteínas de envoltura que posee el virus
(gp160, gp120 y gp41).
2.
Los sueros negativos no deberán mostrar reactividad frente a ninguna
de las proteínas presentes en la tira.
3.
Los sueros indeterminados por WB son cuando, existe reactividad frente a una o más proteínas, o no
cumple el criterio de positividad adoptado.
No hay comentarios:
Publicar un comentario